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預染蛋白Marker和未預染蛋白Marker有哪些不一樣

更新時間:2021-07-27      點擊次數(shù):1575
 
  在Western實驗中,蛋白Marker可以監(jiān)控蛋白質在SDS-PAGE中的遷移,監(jiān)控蛋白的轉膜效率,確定蛋白分子量大小。選擇正確的蛋白Marker是westernblot實驗成功的條件之一。蛋白Marker分為兩種:一種是未預染的Marker,即寬分子量蛋白標準,高分子量蛋白標準及低分子量蛋白標準;另一種是預染的Marker,即單色預染和多色預染。
  一、未預染蛋白Marker
  未預染的蛋白Marker是簡單,也是最準確的一種,由于沒有附帶染料分子或者標記大小正好是蛋白原本的大小,是精確判斷蛋白大小必須的。現(xiàn)在的Marker多數(shù)選用預混合的marker,方便不同大小蛋白的比較。
  二、預染蛋白Marker
  預染蛋白Marker是一些純化較好的蛋白混合物,通過與染料共價偶聯(lián),在電泳過程中或者轉膜時可以直接觀察到。預染Marker的出現(xiàn)方便了我們的實驗,這種蛋白分子量標準可以幫助我們在電泳時,電泳后,以及轉膜后檢測電泳情況和估計遷移率。值得注意的是預染蛋白Marker與染料共價偶聯(lián),所以在不同的緩沖條件下電泳時遷移特性可能會發(fā)生某些變化,可能導致一些偏差,所以不太適合精確定位蛋白。
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